تأثير قيمة درجة الحموضة ودرجة حرارة بيروليدون على محلول مائي PVP يلعب دورا في الحفاظ على الخلية. يمكن أن يقلل التشغيل السليم وظروف التجميد المناسبة من تغيير أو فقدان خصائص الخلية. الحل PVP غير مرتبط لا يوجد لديه thixotropy خاصة، إلا إذا كان التركيز عالية، وسوف يكون thixotropy وتظهر وقتا قصيرا للاسترخاء. تجربة حفظ التبريد الخلوي: اختيار أداة حفظ التبريد المناسبة هو الملك. Cryopreservation الخلية هي التكنولوجيا التي تخزن الخلايا في بيئة منخفضة الحرارة للحد من استقلاب الخلايا وتحقيق التخزين على المدى الطويل. (بيروليدون) في معظم خطوط الخلية ، يرتبط أداء سماكة PVP ارتباطا وثيقا بكتلة جزيئية نسبية. تحت تركيز معين، كلما زادت الكتلة الجزيئية النسبية، كلما زادت لزوجتها. سوف تستمر الخلايا في التراكم والتغيير مع الشيخوخة والتطور ، مما تسبب في النمط الظاهري والنمط الجيني "الانجراف الثقافة". صحيح وناجح التبريد يلعب دورا هاما في التطبيق طويل الأجل للخلايا.
خلال عملية التبريد، لذلك، والثقافة المناسبة وجمع الخلايا لطيف. قبل الحفاظ على التبريد، يجب أن تحافظ الخلايا على حالة نمو جيدة (في مرحلة السجل أو المرحلة الأسية). من الناحية المثالية ، يجب أن تكون الوسيلة 24h قبل استبدال الحصاد. يوصى بتنفيذ التلوث الميكروبي للثقافة ، وخاصة الميكوبلازما ، لضمان عدم تلوث الخلايا. في عملية جمع الخلايا، يجب أن تكون العملية التجريبية لطيفة قدر الإمكان لتجنب تلف الخلايا. (بيروليدون) الصفن المبرد المناسب. في الوقت الحاضر ، فإن التقنية الشائعة الاستخدام لالتبريد الخلوي هي التبريد بالنيتروجين السائل. تستخدم طريقة التجميد البطيء مع كمية مناسبة من عامل الحماية بشكل رئيسي لتجميد الخلايا لتقليل الضرر الذي يلحق بالخلايا أثناء عملية التجميد. إذا تم تجميد الخلايا مباشرة دون إضافة عوامل واقية، فإن الماء داخل وخارج الخلايا سيشكل بلورات جليدية بسرعة، مما سيسبب سلسلة من ردود الفعل السلبية.
البولي فينيلبيروليدون، غليكول الإيثيلين، الميثانول والميثيلاسيتامايد كلها مواد كريوبروتيكتانات. تستخدم عادة في خلية cryopreservation هي ثنائي ميثيل سلفوسيد (DMSO) والجلسرين. هذه المواد اثنين من الوزن الجزيئي الصغيرة، والذوبان عالية، ويمكن أن تخترق بسهولة الخلايا. يمكن أن تخفض نقطة التجمد وتحسين نفاذية أغشية الخلايا إلى الماء. من أجل الخلايا (بيروليدون) DMSO عادة ما يكون تركيز 5-10٪ (v/v)، والتركيز الأمثل يختلف مع خطوط الخلية. التركيز النهائي للجلسرين في المتوسط تجميد هو 5-15٪. مرة أخرى، يعتمد التركيز الأمثل على خط الخلية. من أجل تحسين معدل بقاء الخلايا التي يصعب الحفاظ عليها ، يمكنك اختيار زيادة تركيز المصل في محلول الحفظ أثناء الحفظ بالتبريد. إذا كنت ترغب في تجميد الخلايا بشكل أسرع وأكثر استقرارا، السائل cryopreservation الخلية هو خيار جيد. ليست هناك حاجة للتحضير، فقط إضافة كمية مناسبة من سائل التبريد مباشرة إلى الخلايا. العملية بسيطة ويمكنك الحصول على خلايا عالية الجدوى.